TALLER EXPERIMENTAL

 
 
 
 

El Taller Experimental tiene como objetivo familiarizar al alumno con algunas técnicas de laboratorio, referentes a la obtención y la caracterización de proteínas en una muestra biológica de origen vegetal. Las proteínas son el producto de la expresión génica y por lo tanto su conocimiento permite inferir sobre una base teórica algunos aspectos de los genes y discutir algunas alternativas de mejoramiento genético através de la tecnología del DNA recombinante ó ingeniería genética.

Durante el semestre los alumnos tendrán inicialmente una clase teórica introductoria y posteriormente participarán en dos laboratorios.

En la clase teórica se entregarán conocimientos básicos de proteínas y su separación por electroforesis. También se discutirán las aplicaciones y proyecciones biotecnológicas para la selección y obtención de plantas resistentes a factores de estrés, así como también los pasos a seguir en problemas de ingenería genética en general.

 
El primer laboratorio estará dedicado a la obtención de una fracción celular cruda de plántulas de Prosopis sometidas a estrés salino, utilizando como control muestras de plántulas obtenidas en agua, y determinación de la concentración de proteínas mediante el método Bradford.

En el segundo laboratorio se realizará la técnica de electroforesis en geles de acrilamida denaturantes (PAGE-SDS), haciendo luego una comparación entre el perfil polipeptídico de plántulas control y plántulas sometidas a estrés salino. Se determinarán pesos moleculares y se realizarán aproximaciones teóricas entre el peso molecular de los polipéptidos y de sus correspondientes genes, asumiendo diferentes situaciones teóricas, como por ejemplo en relación a número y longitud de intrones. Además en el laboratorio se entregarán los fundamentos básicos de la inmunodetección de proteínas mediante la técnica de Dot Blot.
 

En relación a la evaluación el alumno deberá entregar un informe (individual) por cada laboratorio. Al finalizar el semestre se realizará una prueba acerca de los informes realizados y de los aspectos teóricos que se hayan discutido con la ayudante, tanto en la clase teórica como en el transcurso de los laboratorios.
 

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